【摘 要】
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Simian virus 40（下称SV40）大T抗原（large tumor antigen）与单克隆抗体PAb416（Papovavirus protein antibody），PAb402或PAb423的免疫复合物，结合到protein A-Sepharose上，然后用限制性胰酶水解法切成分散的片段。PAb402保护特殊的切点，即胰酶水解后的氨基酸残基450～500间，PAb423则保护另一
【机 构】
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中国预防医学中心病毒学研究所,日内瓦大学分子生物系
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Simian virus 40（下称SV40）大T抗原（large tumor antigen）与单克隆抗体PAb416（Papovavirus protein antibody），PAb402或PAb423的免疫复合物，结合到protein A-Sepharose上，然后用限制性胰酶水解法切成分散的片段。PAb402保护特殊的切点，即胰酶水解后的氨基酸残基450～500间，PAb423则保护另一位置，在残基675～699间，如免疫打点所示，125I标记的P Ab416结合到大T抗原的17Kdalton（下称kDa）的N端片段（氨基酸残基1～130），而PAb423结合到大T抗原C端所得到的几个重叠的片段上。这些单克隆抗体作为亲和性探针来研究信使核糖核蛋白（下称mRNPs）与胞浆大T抗原的相互关系。而小T抗原和胞核的大T抗原的免疫反应都是完全的，胞浆大T抗原与PAb402或多克隆抗体的免疫反应，除非用EDTA/RNase A处理除去mRNPs，否则，其免疫反应是很弱的。相反，mRNP/T抗原复合物与PAb416或PAb423有完全的免疫反应而不需要用EDTA/RNase A处理。说明在大T抗原上P Ab402的结合位置由于与mRNPs的相互作用，其免疫反应被阻断，而PAb416在N端的结合位置及PAb423在C端的结合位置保留了对抗体的亲和性。
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