耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白的低温诱导表达纯化及免疫原性的鉴定

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目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)PBP2a的原核表达及其免疫源性的鉴定。方法根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,将mecA基因的70~2006bp克隆至pET28a载体,转化E.coliBL21(DE3);经IPTG低温诱导表达后,利用镍琼脂糖凝胶亲和层析技术纯化目的蛋白;用抗PBP2a抗体鉴定纯化蛋白的免疫源性。结果成功构建了不合跨膜区的PBP2a原核表达载体,在低温诱导条件下获取的蛋白纯化后无杂蛋白;该蛋白能与商品化抗PBP2a单克隆抗体结合。结论利用分子
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