猪血凝性脑脊髓炎病毒HE基因的克隆及真核表达

来源 :吉林农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cfj4208

【摘要】

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应用特异性引物，从猪血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）中扩增出HE蛋白基因，PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体，得到重组质粒pTHE。用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pTHE，回收目的基因HE片段并将其定向克

【作者】

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陆慧君宋德光贺文琦尹继刚王龙涛高丰

【机构】

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吉林大学畜牧兽医学院,吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室,吉林农业大学动物科学技术学院

【出处】

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吉林农业大学学报

【发表日期】

：

2008年6期

【关键词】

：

血凝性脑脊髓炎病毒 HE蛋白克隆表达 hemagglutinating encephalomyelitis virus HE protein cloning

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（30671551）,吉林省科技发展计划重点项目（20060206-2）

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应用特异性引物，从猪血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）中扩增出HE蛋白基因，PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体，得到重组质粒pTHE。用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pTHE，回收目的基因HE片段并将其定向克隆到pPiCZαA中，构建重组质粒pPiCZαA HE。用BstXⅠ酶切pPICZαA HE使其线性化，并电击转化至感受态毕赤酵母细胞GS115。PCR法鉴定阳性重组子，用1％甲醇诱导表达后，进行SDS-PAGE及westem blot分析。结果在酵母菌培养基上清中检测到相对分子量为43kD的重组蛋白，且该

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