【摘 要】
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目的利用杆状病毒表达系统探讨人磷酸二酯酶同工酶3A(HPDE3A)在Tn细胞中的表达.方法用重组HPDE3A杆状病毒感染昆虫Tn细胞进行蛋白表达,通过RT-PCR,SDS-PAGE和Western blottin
【机 构】
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江苏大学,中国医学科学院、中国协和医科大学
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);
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目的利用杆状病毒表达系统探讨人磷酸二酯酶同工酶3A(HPDE3A)在Tn细胞中的表达.方法用重组HPDE3A杆状病毒感染昆虫Tn细胞进行蛋白表达,通过RT-PCR,SDS-PAGE和Western blotting技术检测HPDE3A表达情况.结果重组杆状病毒在感染Tn细胞后形态变化明显,获得表达产物,RT-PCR扩增结果证实了Tn细胞中HPDE3A的mRNA水平增高,Tn细胞能够表达出与HPDE3A多克隆抗体结合的蛋白,蛋白分子质量约为120 kD.结论 HPDE3A在昆虫杆状病毒表达系统中可以稳定表达,为进一步研究HPDE3A的生物学活性及筛选HPDE3A抑制剂奠定了基础.
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