论文部分内容阅读
目的:克隆狂犬病毒ERA株核蛋白基因并对核蛋白主要抗原表位进行分析。方法:根据GenBank中已发表的RVN基因序列,设计合成了1对特异性引物,对RVERA株N基因进行了RT-PCR扩增。将PCR产物纯化后与pMD18-T连接得到重组质粒pMD-N,并进行核苷酸序列测定。结果:该基因全长1353bp,编码450个氨基酸。RVERA株与Gen-Bank中RV不同固定毒株和分离毒株N基因相比,核苷酸的同源性为98.0%~99.6%,推导的氨基酸序列的同源性为98.3%~99.6%。核蛋白主要抗原表位分析表明,ERA株与其他固定毒株和分离毒株相比,仅在BC抗原表位(369~383位氨基酸)和Th抗原表位(394~408位氨基酸)处有1~3个氨基酸的不同,其他表位无差异。但与Lagosbat、Mokola和Duvenhage毒株相比,抗原位点氨基酸组成差异明显。结论:RVERA株N基因可用于基因工程疫苗研制和核酸检测的靶基因;核蛋白可作为抗原用于狂犬病的检测。