【摘 要】
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为建立一种简单可靠的小鼠肝内胆管上皮细胞（MIBECs）分离培养方法,用Ⅳ型胶原酶进行门静脉灌注,取出肝内胆管,用DNaseⅠ、pronase E和Ⅳ型胶原酶分类消化,小鼠肝内胆管组织细小
【机 构】
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徐州医学院病原生物学与免疫学教研室
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为建立一种简单可靠的小鼠肝内胆管上皮细胞（MIBECs）分离培养方法,用Ⅳ型胶原酶进行门静脉灌注,取出肝内胆管,用DNaseⅠ、pronase E和Ⅳ型胶原酶分类消化,小鼠肝内胆管组织细小、均匀的细胞团培养于含100mL/L胎牛血清（FBS）和10ng/mL表皮生长因子（EGF）、肝细胞生长因子（HGF）和胰岛素转铁蛋白硒（ITS）的DMEM/F12培养基中。细胞贴壁后,利用细胞角蛋白19免疫荧光法鉴定目的细胞。在培养的过程中,用CCK8测定细胞的生长曲线。结果显示,成功分离出MIBECs,细胞纯度约95
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