【摘 要】
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目的构建人MEKK3基因的小干扰RNA（siRNA）重组腺病毒载体表达载体，观察其在胃腺癌AGS细胞中对MEKK3的表达抑制。方法设计并合成针对人MEKK3基因3个不同部位siRNA靶点的模板DNA序
【机 构】
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南京军区福州总医院分子医学研究中心
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目的构建人MEKK3基因的小干扰RNA（siRNA）重组腺病毒载体表达载体，观察其在胃腺癌AGS细胞中对MEKK3的表达抑制。方法设计并合成针对人MEKK3基因3个不同部位siRNA靶点的模板DNA序列，以MluI及XhoI克隆入pRNAT—H1．1／Adeno穿梭载体中，得到的质粒用Pme I线性化后在大肠埃项菌BJ5183中与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组。卡那霉素筛选后，用PacI酶切鉴定。鉴定正确的质粒经Pac I酶切、乙醇沉淀后转染293A细胞，包装得到具有感染能力的pAd—MEK
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