重组色素上皮细胞衍生因子的制备及其对脑胶质瘤血管新生的影响

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目的 用大肠杆菌表达色素上皮细胞衍生因子(PEDF),及评价其在脑胶质瘤血管新生中的作用.方法构建pET41/PEDF表达载体,用金属亲和层析(His Tag)和阴离子交换层析纯化重组蛋白,并以管腔形成试验验证重组蛋白活性.同时,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血管内皮细胞生长因子(VEGF)与血小板反应素-1(TSP-1)的变化.结果用基因工程手段获得终产量为3.8 mg/L,可抑制内皮细胞管腔形成的PEDF蛋白;PEDF可下调VEGF(减少1.8倍)和上调TSP-1(增高5.3倍)的表达. 结论 PEDF可能是抑制脑胶质瘤新生血管形成的主要因素。

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