目的 观察富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基因1(LRIG1)基因过表达对人肝癌细胞株Hep-G2体内外恶性表型的影响并探讨其作用机制.方法 使用10％胎牛血清(FBS)的DMEM(改良伊戈尔培养基)培养基对Hep2进行培养48 h后,分别进行不转染,转染pEGFP-N1和转染pEGFP-N1-LRIG1的处理,相对应分为未处理组、pEGFP-N1空载体组和pEGFP-N1-LRIG1实验组.再采用细胞计数试剂盒(CCK-8)比色法、Transwell法、实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot等方法分析LRIG1基因过表达对肝癌细胞株Hep-G2生长增殖和侵袭能力的影响,以及胞膜上表皮生长因子受体(EGFR)的mRNA与蛋白水平的变化.结果 CCK-8结果显示,未处理组、pEGFP-N1空载体组、pEGFP-N1-LRIG1质粒组在24、48、72h作用时间处的吸光度值分别为:0.968±0.050、0.924±0.070、0.552±0.060;0.975±0.120、0.864±0.200、0.509±0.130;0.983±0.180、0.803±0.140、0.465±0.230；与未处理组和空载体组比较,LRIG1对Hep-G2细胞有明显抑制效应(P＜0.05)；细胞侵袭实验结果表明,LRIG1过表达组、未处理及空载体组侵袭实验透膜细胞数分别为(6.24±1.52)个、(15.19±1.32)个和(14.85±1.24)个(P＜0.05)；与未处理组和空载体组比较,LRIG1能显著抑制Hep-G2细胞的侵袭能力(P＜ 0.05)；Real-time PCR及Western blot实验结果显示,LRIG1过表达组能显著抑制EGFR在Hep-G2细胞中mRNA和蛋白水平的表达(P＜0.05).结论 LRIG1可能通过抑制EGFR的表达来抑制Hep-G2细胞在体内外的增殖。
富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基因1对人肝癌细胞株Hep-G2恶性表型的影响及其作用机制
【摘 要】
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目的 观察富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基因1(LRIG1)基因过表达对人肝癌细胞株Hep-G2体内外恶性表型的影响并探讨其作用机制.方法 使用10％胎牛血清(FBS)的DMEM(改良伊戈尔培养基)培养基对Hep2进行培养48 h后,分别进行不转染,转染pEGFP-N1和转染pEGFP-N1-LRIG1的处理,相对应分为未处理组、pEGFP-N1空载体组和pEGFP-N1-LRIG1实验组
【机 构】
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430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科,430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科,430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科,430030武
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2012年29期
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