【摘 要】
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应用PCR从产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)中扩增出不含信号肽序列的K99菌毛蛋白基因片段,克隆测序后,将该片段连接到E.coli表达载体pET28a(+)中,转化E.coli表达菌株BL21(DE3),筛选
【机 构】
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南京大学生命科学院生物科学与技术系,上海市农业科学院生物技术中心,南京大学生命科学院生物科学与技术系,上海市农业科学院畜牧兽医研究所
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应用PCR从产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)中扩增出不含信号肽序列的K99菌毛蛋白基因片段,克隆测序后,将该片段连接到E.coli表达载体pET28a(+)中,转化E.coli表达菌株BL21(DE3),筛选得到可诱导表达K99抗原的工程菌株.经IPTG诱导,分离纯化K99重组蛋白,以其免疫新西兰大白兔,获得重组蛋白的兔抗血清;免疫印迹分析表明,此重组蛋白制备的抗血清能与标准的K99强毒株发生明显的抗原抗体反应.
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