【摘 要】
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目的对人胃肿瘤组织中缺失型 Midkine(tMK)基因进行克隆并在大肠杆菌中表达.方法根据Genbank报道的序列,设计一对引物,通过RT-PCR从胃肿瘤患者肿瘤组织中获得了tMK成熟肽DNA
【机 构】
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南京大学医学院免疫与生殖生物学实验室,南京大学生命科学院
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目的对人胃肿瘤组织中缺失型 Midkine(tMK)基因进行克隆并在大肠杆菌中表达.方法根据Genbank报道的序列,设计一对引物,通过RT-PCR从胃肿瘤患者肿瘤组织中获得了tMK成熟肽DNA编码序列,与pMD18 T-vector连接测序后,将该片段克隆入大肠杆菌高效表达载体pBV222中,转化大肠杆菌DH5α, 在42℃进行诱导表达.结果在胃肿瘤组织中克隆到tMK 表达基因,并获得高效表达tMK重组蛋白的工程菌株DH5α/pBV222-tMK.SDS-PAGE结果表明,pBV222-tMK表达的重组
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