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目的：探讨罗汉果皂苷Ⅵ（MⅥ）对脂多糖（LPS）致体外肝细胞损伤的保护作用及其机制。方法：构建LPS诱导的L02细胞损伤模型，采用不同浓度（7.5、15、30μmol/L）MⅥ或30μmol/L MⅥ联合4 mmol/L PGC-1α抑制剂SR-18292处理24 h,MTT检测细胞增殖活性；比色法检测细胞培养上清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平，以及细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量；流式细胞术检测细胞凋亡率；Mito-Tracker Green染色法观察细胞线粒体分裂；qRT-PCR检测线粒体DNA（mtDNA）的拷贝数；qRT-PCR和Western blotting检测细胞中PGC-1α、NRF-1、TFAM的表达水平。结果：与对照组比较，LPS组L02细胞增殖活性及胞内GSH-Px和SOD活性均明显降低（P<0.05）；细胞凋亡率，上清液中ALT、AST水平及胞内MDA含量均明显升高（P<0.05）；线粒体分裂水平、mtDNA拷贝数及PGC-1α、NRF-1、TFAM的mRNA和蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。与LPS组比较，不同剂量MⅥ处理后，细胞增殖活性及胞内GSHPx和SOD活性均明显升高（P<0.05）；细胞凋亡率，上清液中ALT、AST水平及胞内MDA含量均明显降低（P<0.05）；线粒体分裂水平、mtDNA拷贝数及PGC-1α、NRF-1、TFAM的mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）。然而，SR-18292处理可明显抑制MⅥ对细胞损伤的改善效果。结论：MⅥ能有效改善LPS致体外肝细胞损伤，其潜在的分子机制可能是通过增强PGC-1α/NRF-1/TFAM信号通路，进而促进肝细胞线粒体生物合成，降低细胞内氧化应激水平，抑制细胞凋亡。