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摘 要：本实验建立紫外分光光度法测定决明子中炮制前后多酚含量的方法。以乙醇作为溶剂，制备供试品溶液并进行方法学研究。没食子酸标品在1.00～3.50?g/mL范围内线性关系良好（R2=0.9993），回归方程为：y=0.198x-0.0130，样品平均回收率分别为98.63%。本论文所建立的方法稳定可靠，简便可行，为决明子药材的质量评价和质量控制奠定了基础。
关键词：决明子；炮制；紫外分光光度法
1 仪器与试药
U-1810紫外分光光度计（河北普新精密仪器有限责任公司）、没食子酸对照品（批号：140509，陕西乐博生化科技有限公司）、福林酚试剂（批号：P/NF-9252，美国公司）、决明子（采购于盛堂制药公司）经鉴定为豆科植物决明或者小决明的干燥成熟种子。
2 方法与结果
2.1对照品溶液的制备
称取没食子酸对照品约20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加蒸馏水溶解并定容至刻度，即得。
2.2 决明子的炮制
不同的炮制方法浸出的多酚含量均有不同程度的降低或升高。决明子经炮制后，多酚浸出物含量有所提高，传统炮制方法认为，用文火炒至发出香气即可，所以本实验研究决明子的炮制应以炒至外焦内老黄色、种皮破裂具有香气为宜。
2.3 供试品溶液的配制
供试品溶液的制备：取粉碎后的决明子粉末0.5g，精密称定，加入乙醇50mL，精密称定重量，放置在水浴上超声加热回流30分钟，静置冷却后，再称重，用乙醇补足失重，摇匀，过滤，精密吸取25mL过滤液，减压回收乙醇，残渣用碳酸钠溶解至10 mL量瓶中定容，摇匀，即得。
2.4 最大波长的确定
精密量取供试品溶液和对照品溶液各适量，分别放置于容量瓶中，各加水至等刻度，加福林酚试剂，摇匀，静置，加7.5%Na2CO3溶液适量，加水至刻度，摇匀，精置后，同时作空白对照，在波长为400-800nm可见光区扫描，获取最大吸收波长为740nm。
2.5 线性关系考察
精密吸取对照品溶液1mL、1.5mL、2mL、2.5mL、3mL、3.5mL分别将其加入10mL的容量瓶中，加入无水乙醇-乙酸乙酯（2：1）的混合溶液至刻度，摇匀，得对照品系列溶液，测定各样品的吸光度。以浓度为横坐标（x），吸光度为纵坐标（y），绘制标准曲线，得回归方程y=0.198x-0.0130。
2.6 精密度试验
精密吸取没食子酸对照品液，平行测定5次，记录吸光度值。计算得RSD为0.66%，表明该测量仪器精密度良好。
2.7 重复性试验
取决明子粉末0.5g，共5份，精密称定，分别按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述条件进行紫外分光光度法分析，记录吸光度值。计算得RSD为1.25%，表明该样品测定重复性良好。
2.8 稳定性试验
取决明子粉末0.5g，共6份，精密称定，分别按“2.3”项下方法制备供试品溶液，分别在0h，1h，2h，3h，4h，5h按上述条件进行分析，记录吸光度值。计算得RSD为0.98%，表明该决明子多酚在5h内稳定性良好。
2.9 加样回收率试验
精密称取“2.6”项下已测得多酚成分含量的样品5份，每份约0.25g，精密称定，每份分别加入等量对照品溶液，分别按“2.3”项下方法制备供试品溶液，分别测定，记錄吸光度值，平均加样回收率为98.63%，RSD为1.88%。表明该试验方法比较稳定，操作简便可行。
2.10 样品含量测定
分别称取炮制前后的决明子粉末（过60目筛）约0.5g，各3份，精密称定。按照“2.3”项下方法制备成供试品溶液，按上述条件进行分析，记录吸光度值，根据标准曲线计算样品中决明子炮制前后的多酚含量，结果见表1。
3 小结
本实验建立紫外分光光度法测定了不同炮制方法决明子药材中多酚成分的含量，方法学研究表明所建立的定量方法稳定、可靠、重复性良好，为评价决明子的多酚成分提供了一种可靠的测量方法，同时为进一步研究决明子的药理活性作用、质量控制和临床新产品研究开发利用提供了数据支持。
参考文献：
[1] 董晓强，尹占芳.决明子的化学成分及药理作用研究[J].中国当代医药，2013，20（7）：18-23.
[2] 王玉宝.紫外分光光度法测定决明子中蒽醌类成分含量[J].中医药临床杂志报，2013，25（8）：730-732.
项目说明：本文系陕西国际商贸学院校级课题成果，课题名称为微波辅助提取决明子中多酚类成分及炮制前后含量变化研究，编号为SMXY201720
关键词：决明子；炮制；紫外分光光度法
1 仪器与试药
U-1810紫外分光光度计（河北普新精密仪器有限责任公司）、没食子酸对照品（批号：140509，陕西乐博生化科技有限公司）、福林酚试剂（批号：P/NF-9252，美国公司）、决明子（采购于盛堂制药公司）经鉴定为豆科植物决明或者小决明的干燥成熟种子。
2 方法与结果
2.1对照品溶液的制备
称取没食子酸对照品约20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加蒸馏水溶解并定容至刻度，即得。
2.2 决明子的炮制
不同的炮制方法浸出的多酚含量均有不同程度的降低或升高。决明子经炮制后，多酚浸出物含量有所提高，传统炮制方法认为，用文火炒至发出香气即可，所以本实验研究决明子的炮制应以炒至外焦内老黄色、种皮破裂具有香气为宜。
2.3 供试品溶液的配制
供试品溶液的制备：取粉碎后的决明子粉末0.5g，精密称定，加入乙醇50mL，精密称定重量，放置在水浴上超声加热回流30分钟，静置冷却后，再称重，用乙醇补足失重，摇匀，过滤，精密吸取25mL过滤液，减压回收乙醇，残渣用碳酸钠溶解至10 mL量瓶中定容，摇匀，即得。
2.4 最大波长的确定
精密量取供试品溶液和对照品溶液各适量，分别放置于容量瓶中，各加水至等刻度，加福林酚试剂，摇匀，静置，加7.5%Na2CO3溶液适量，加水至刻度，摇匀，精置后，同时作空白对照，在波长为400-800nm可见光区扫描，获取最大吸收波长为740nm。
2.5 线性关系考察
精密吸取对照品溶液1mL、1.5mL、2mL、2.5mL、3mL、3.5mL分别将其加入10mL的容量瓶中，加入无水乙醇-乙酸乙酯（2：1）的混合溶液至刻度，摇匀，得对照品系列溶液，测定各样品的吸光度。以浓度为横坐标（x），吸光度为纵坐标（y），绘制标准曲线，得回归方程y=0.198x-0.0130。
2.6 精密度试验
精密吸取没食子酸对照品液，平行测定5次，记录吸光度值。计算得RSD为0.66%，表明该测量仪器精密度良好。
2.7 重复性试验
取决明子粉末0.5g，共5份，精密称定，分别按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述条件进行紫外分光光度法分析，记录吸光度值。计算得RSD为1.25%，表明该样品测定重复性良好。
2.8 稳定性试验
取决明子粉末0.5g，共6份，精密称定，分别按“2.3”项下方法制备供试品溶液，分别在0h，1h，2h，3h，4h，5h按上述条件进行分析，记录吸光度值。计算得RSD为0.98%，表明该决明子多酚在5h内稳定性良好。
2.9 加样回收率试验
精密称取“2.6”项下已测得多酚成分含量的样品5份，每份约0.25g，精密称定，每份分别加入等量对照品溶液，分别按“2.3”项下方法制备供试品溶液，分别测定，记錄吸光度值，平均加样回收率为98.63%，RSD为1.88%。表明该试验方法比较稳定，操作简便可行。
2.10 样品含量测定
分别称取炮制前后的决明子粉末（过60目筛）约0.5g，各3份，精密称定。按照“2.3”项下方法制备成供试品溶液，按上述条件进行分析，记录吸光度值，根据标准曲线计算样品中决明子炮制前后的多酚含量，结果见表1。
3 小结
本实验建立紫外分光光度法测定了不同炮制方法决明子药材中多酚成分的含量，方法学研究表明所建立的定量方法稳定、可靠、重复性良好，为评价决明子的多酚成分提供了一种可靠的测量方法，同时为进一步研究决明子的药理活性作用、质量控制和临床新产品研究开发利用提供了数据支持。
参考文献：
[1] 董晓强，尹占芳.决明子的化学成分及药理作用研究[J].中国当代医药，2013，20（7）：18-23.
[2] 王玉宝.紫外分光光度法测定决明子中蒽醌类成分含量[J].中医药临床杂志报，2013，25（8）：730-732.
项目说明：本文系陕西国际商贸学院校级课题成果，课题名称为微波辅助提取决明子中多酚类成分及炮制前后含量变化研究，编号为SMXY201720