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【中图分类号】 G633.8 【文献标识码】B 【文章编号】 1001-4128(2011) 09-0158-01
关于蛋白质的“盐析”实验,一直以来都是高中化学教学中的重点。可是往往很多老师和同学们在做演示实验的时候并不如课本上讲的那么轻易就能得到满意的效果,相反,这个实验的操作看起来简单但是要想做成功达到满意的效果并不是那么容易。下面我就这个实验操作中需要注意的几个重要细节来强调一下。
1 首先,我们要配置蛋白质溶液
在这里,蛋白液务必用新鲜的鸡蛋清为原料,切忌混入蛋黄。此外蛋清中应该注入大约1:6的蒸馏水。特别重要的是,要把兑水的蛋白液在锥形瓶内充分的振荡,至少要五分钟。因为我们要保证让蛋白液在水中溶解程度达到最大,这样才能达到满意实验效果。
2 保证硫酸铵溶液的浓度达到饱和
课本上提到“轻金属盐的稀溶液可促进蛋白质的溶解,而其浓溶液能降低蛋白质的溶解度”。也就是说,假如我们配置硫酸铵溶液浓度偏低,不仅得不到“盐析”现象,而且会起到相反的效果促进了蛋白的溶解,溶液会变得澄清。
3 沿试管壁缓缓向蛋白液中滴加硫酸铵溶液
这个步骤中需要特别注意的是,胶头滴管向鸡蛋白液中滴加硫酸铵不可以一滴滴直接加入,而是沿着试管内壁小心挤出溶液使其缓缓慢慢流到蛋白液中混合。因为如果胶头滴管在试管口直接滴加会使硫酸铵溶液在滴入的同时震动了液面,这将破坏到我们观察“盐析”出的丝丝缕缕沉淀,而将只会看到浑浊的液体。
4 可用硫酸铵的固体小颗粒代替饱和溶液
当我们向鸡蛋白液中加入饱和硫酸铵溶液时,在盐析之前,我们首先会看到溶液变得澄清。对于这一现象的出现,很多老师会困惑并以为实验失败了而放弃继续加入硫酸铵饱和溶液。其实不然,原因在于尽管我们滴加的是饱和硫酸铵溶液但是加入少量时蛋白液中的水会将它稀释,这样硫酸铵溶液实际上就变得稀薄了,从而促进了蛋白质的溶液,使其变得澄清。当我们继续慢慢加入时,硫酸铵加入的多了,被稀释的程度也将随之减小。这样当硫酸铵溶液浓度足够大时就可以降低蛋白质的溶解度使其“沉淀”出来,观察到“盐析”。如果想让实验现象更明显快捷,可以尝试用少量的固体硫酸铵颗粒慢慢加入。
5 用胶头滴管将沉淀出的蛋白质吸出
为了证明“盐析”这一现象的可逆性,可将沉淀出的蛋白质用胶头滴管吸出少许,然后加入到适量蒸馏水中,沉淀会消失,我们观察不到混浊物,则证明蛋白质又重新溶解。
关于蛋白质的“盐析”实验,一直以来都是高中化学教学中的重点。可是往往很多老师和同学们在做演示实验的时候并不如课本上讲的那么轻易就能得到满意的效果,相反,这个实验的操作看起来简单但是要想做成功达到满意的效果并不是那么容易。下面我就这个实验操作中需要注意的几个重要细节来强调一下。
1 首先,我们要配置蛋白质溶液
在这里,蛋白液务必用新鲜的鸡蛋清为原料,切忌混入蛋黄。此外蛋清中应该注入大约1:6的蒸馏水。特别重要的是,要把兑水的蛋白液在锥形瓶内充分的振荡,至少要五分钟。因为我们要保证让蛋白液在水中溶解程度达到最大,这样才能达到满意实验效果。
2 保证硫酸铵溶液的浓度达到饱和
课本上提到“轻金属盐的稀溶液可促进蛋白质的溶解,而其浓溶液能降低蛋白质的溶解度”。也就是说,假如我们配置硫酸铵溶液浓度偏低,不仅得不到“盐析”现象,而且会起到相反的效果促进了蛋白的溶解,溶液会变得澄清。
3 沿试管壁缓缓向蛋白液中滴加硫酸铵溶液
这个步骤中需要特别注意的是,胶头滴管向鸡蛋白液中滴加硫酸铵不可以一滴滴直接加入,而是沿着试管内壁小心挤出溶液使其缓缓慢慢流到蛋白液中混合。因为如果胶头滴管在试管口直接滴加会使硫酸铵溶液在滴入的同时震动了液面,这将破坏到我们观察“盐析”出的丝丝缕缕沉淀,而将只会看到浑浊的液体。
4 可用硫酸铵的固体小颗粒代替饱和溶液
当我们向鸡蛋白液中加入饱和硫酸铵溶液时,在盐析之前,我们首先会看到溶液变得澄清。对于这一现象的出现,很多老师会困惑并以为实验失败了而放弃继续加入硫酸铵饱和溶液。其实不然,原因在于尽管我们滴加的是饱和硫酸铵溶液但是加入少量时蛋白液中的水会将它稀释,这样硫酸铵溶液实际上就变得稀薄了,从而促进了蛋白质的溶液,使其变得澄清。当我们继续慢慢加入时,硫酸铵加入的多了,被稀释的程度也将随之减小。这样当硫酸铵溶液浓度足够大时就可以降低蛋白质的溶解度使其“沉淀”出来,观察到“盐析”。如果想让实验现象更明显快捷,可以尝试用少量的固体硫酸铵颗粒慢慢加入。
5 用胶头滴管将沉淀出的蛋白质吸出
为了证明“盐析”这一现象的可逆性,可将沉淀出的蛋白质用胶头滴管吸出少许,然后加入到适量蒸馏水中,沉淀会消失,我们观察不到混浊物,则证明蛋白质又重新溶解。