【摘 要】
：
目的探究人体中与结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis，Mtb)Rv1705c蛋白相互作用的蛋白质。方法原核表达Rv1705c蛋白基因，收集包涵体，裂解后透析纯化Rv1705c并测定其浓度，ELISA法检测细菌Rv1705c刺激巨噬细胞后细胞因子IFN-γ的分泌量，使用纯化并带有生物素标记的Rv1705c孵育人蛋白质组芯片HuProt™，筛选与Rv1705c相互作用的人类蛋白质，使用GenePixPro6.0软件对蛋白质芯片的信号图像进行数据提取，使用GO、KEGG等多个数据库进
【机 构】
：
深圳市慢性病防治中心临床检验科，深圳 518020深圳市慢性病防治中心临床检验科，深圳 518020深圳市慢性病防治中心临床检验科，深圳 518020深圳市慢性病防治中心临床检验科，深圳 518020
论文部分内容阅读
目的探究人体中与结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，Mtb)Rv1705c蛋白相互作用的蛋白质。
方法原核表达Rv1705c蛋白基因，收集包涵体，裂解后透析纯化Rv1705c并测定其浓度，ELISA法检测细菌Rv1705c刺激巨噬细胞后细胞因子IFN-γ的分泌量，使用纯化并带有生物素标记的Rv1705c孵育人蛋白质组芯片HuProt™，筛选与Rv1705c相互作用的人类蛋白质，使用GenePix Pro 6.0软件对蛋白质芯片的信号图像进行数据提取，使用GO、KEGG等多个数据库进行生物信息学分析，GST pulldown验证Rv1705c与PSMA3、RSAD2的相互作用。
结果纯化结果显示，Rv1705c在包涵体中表达，Rv1705c刺激巨噬细胞后IFN-γ分泌量显著上升。芯片结果显示共筛选出了29个与Rv1705c相互作用的潜在阳性蛋白质，其中PSMA3、NLN、THOP1、UPF3A、RSAD2、OMG、PNKD、STEAP3、MED8共9个蛋白质的信噪比(signal-to-noise ratio，SNR)>1.6。进一步的生物信息学分析发现候选蛋白PSMA3、RSAD2、C1QBP参与固有免疫应答激活信号转导，并且PSMA3、RSAD2与干扰素存在交互作用，GST pulldown验证PSMA3、RSAD2与Rv1705c确有相互作用。
结论发现并验证PSMA3、RSAD2与Rv1705c存在相互作用，为Mtb感染机制的研究提供参考。
其他文献
本文报道1例反复漏诊的先天性左肾动静脉瘘(RAVF)伴左肾多支动脉合并椎骨侧弯畸形病例。患者因反复血尿1年于2020年8月29日入院。外院行两次输尿管软镜检查、入院后的影像学和实验室检查均未明确血尿病因。通过仔细阅读增强CT检查图片发现肾窦下极血管结构紊乱，血管迂曲成团，肾盂周围也可见扩张迂曲血管，考虑血尿原因为肾脏血管畸形引起。为查明病因，行肾动脉数字减影血管造影(DSA)检查，结果提示先天性左肾RAVF伴左肾3支供养动脉，行动静脉瘘供养动脉栓塞治疗。对于常规影像学和实验室检查排除肿瘤、结石、结核、凝血
患者，女，85岁，2018年12月10日因肉眼血尿10d就诊于无锡市第二人民医院，影像学检查提示膀胱占位。行经尿道膀胱肿瘤切除术，术后病理诊断为膀胱原发性少色素性恶性黑色素瘤。未进行后续治疗。术后17个月复发，再次行经尿道膀胱肿瘤切除术，术后15d患者因恶病质死亡。膀胱原发性少色素性恶性黑色素瘤非常罕见，易误诊，诊断需依靠免疫组化染色检查。本病预后差。
DNA损伤修复(DDR)基因突变在转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者中的发生率可达8%~16%，DDR基因突变与不良预后明显相关。DDR基因突变，尤其是BRCA1/2突变患者，对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂(PARRi)及铂类治疗有较高敏感性。
研究结果显示，寡转移具有独特的生物学特性，对于寡转移性前列腺癌患者采取早期积极治疗，可延缓疾病进展并改善生存结局。但目前对于寡转移的定义尚未明确，其最佳治疗方式仍是医学界关注的主要问题，本文对近年来寡转移性前列腺癌的定义及综合治疗模式等方面的研究进展进行综述。
一些肾结石病是由单基因病所致，其中与嘌呤代谢相关的单基因病主要包括腺嘌呤磷酸核糖基转移酶(APRT)缺乏症、次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖基转移酶(HPRT)缺乏症、遗传性黄嘌呤尿症(HX)以及由PRS1、SLC22A12、SLC2A9和ABCG2等基因突变所致病症。这类疾病可导致嘌呤和尿酸代谢异常，进而形成2，8-二羟基腺嘌呤结石、尿酸结石或黄嘌呤结石等。此类疾病临床罕见，不同类型的与嘌呤代谢相关的单基因肾结石病的基因型和表型有其各自特点，且不被广泛认知。目前药物治疗是此类疾病的主要治疗方法。随着基因诊断和
目的了解浙西南山区(丽水市)人类免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus，HIV)感染者和艾滋病(acquiredimmunodeficiencysyndrome，AIDS)患者的分子传播网络特征。方法收集丽水市2020年新确证且未经抗病毒治疗HIV/AIDS感染病例血样共147例，扩增HIV-1pol区基因并测序。使用MEGA6.0软件构建系统进化树判断亚型，HIVDB在线分析治疗前耐药突变及耐药水平；计算两两序列间基因距离(geneticdistance，GD)，确定最佳GD
目的了解2015—2019年南京市HIV-1CRF07_BC的流行史、进化模式和传播特征，为精准防控该毒株的传播提供科学依据。方法对南京市319例HIV-1CRF07_BC患者的pol区基因序列扩增测序并构建最大似然树。使用MCMC(MarkovChainMonteCarlo)算法生成MCC树(MaximumCladeCredibilitytree)，使用BSP(BayesianSkylinePlot)法重塑有效人口规模数变化趋势。采用成对基因距离法构建分子网络探究其传播特征。结果319名HIV-1CRF
目的了解河北省保定地区2020年全部新诊断的HIV-1感染者中，HIV-1毒株基因型和耐药发生情况。方法使用自建的方法扩增HIV-1pol区全长基因并测序，系统进化分析鉴定HIV-1亚型，将基因序列上传至美国斯坦福大学的HIV耐药数据库，分析耐药突变位点发生情况。结果共收集新诊断HIV-1感染者96例，获得pol区全长83条，研究人群中男性88例(91.7%)，平均年龄为39岁，已婚者54例(56.3%)，感染途径以性接触途径(95.8%，92/96)为主，其中同性性传播占75.0%(72/96)；系统进
目的分析整合酶(IN)区主要耐药突变对HIV-1CRF01_AE毒株耐药的影响，并比较与B亚型毒株的差异。方法根据美国斯坦福大学HIV耐药数据库选择7个IN区突变或联合突变(T66K、F121Y、Q148K、N155H、G118R、R263K、Q148K/N155H)，通过无缝克隆同源重组及点突变的方法引入到HIV-1B亚型感染性克隆pNL4-3和CRF01_AE感染性克隆pGX002的IN区，转染293T细胞包装病毒，在MT2细胞上扩大培养并测定感染性滴度。检测4种整合酶链转移抑制剂(INSTIs)，拉
目的探讨长链非编码RNA(longnon-codingRNAs，lncRNA)Gm13568对A1型星形胶质细胞活化及实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis，EAE)小鼠疾病进程的影响与分子机制。方法构建特异性靶向星形胶质细胞的lncRNAGm13568沉默与对照的重组慢病毒载体，分别命名为LV-Inhibit-Gm13568和LV-ctrl，并包装病毒。1×107TU病毒悬液静脉注射入C57BL/6小鼠体内7d后，髓鞘少突胶质细胞糖蛋白3