奶牛SRY基因HMG box酵母表达载体构建与表达

来源 :中国畜牧杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Yhead705
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研究从牛血中提取总RNA,设计特异性引物,利用RT—PCR技术扩增出SRY基因HMG box基因片段。将该片段与pMD18-T载体连接并转化到E.coli Top10中,提取质粒并用EcoRⅠ、AvrⅡ酶消化,将消化后的目的基因纯化并回收,与经同样酶消化并纯化回收的载体pPIC9K连接再转化到E.coli Top10,获得重组表达质粒pPIC9K—SRYHMG box,筛选出阳性酵母表达载体pPIC9K—SRY—HMG box在酵母菌中诱导表达。结果表明:成功构建了pPIC9K—SRY—HMG box酵母
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