【摘 要】
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目的以原核表达的脑心肌炎病毒（EMCV）VP1蛋白作为检测抗原,建立间接ELISA方法用来检测EMCV抗体。方法应用原核表达载体pET-28a构建家养野猪源EMCV VP1基因的重组表达质粒,并在
【机 构】
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河南农业大学生命科学学院,河南农业大学牧医工程学院
【基金项目】
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河南省高校科技创新团队支持计划（No.14IRTSTHN015）, 国家自然科学基金委（No.31272567）资助~~
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目的以原核表达的脑心肌炎病毒（EMCV）VP1蛋白作为检测抗原,建立间接ELISA方法用来检测EMCV抗体。方法应用原核表达载体pET-28a构建家养野猪源EMCV VP1基因的重组表达质粒,并在感受态细胞BL21中表达,将该重组蛋白纯化后作为包被抗原,建立间接ELISA标准化检测程序,并应用于临床检测。结果经双酶切、PCR和测序鉴定,重组质粒pET-28a-VP1构建成功,转化后诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析得到高效表达的VP1蛋白,该重组蛋白可被EMCV阳性血清特异性识别,具有良好的反应原性;通
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