【摘 要】
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从超嗜热需氧古细菌Aeropyrum pernix K1中抽提出染色体基因组，经PCR扩增得到磷脂酶A2基因，用带有His—tag标记的pET15b作为表达载体，在大肠杆菌BLP中成功地诱导表达。表达产物
【机 构】
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广州市达瑞抗体工程技术有限公司,吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室
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从超嗜热需氧古细菌Aeropyrum pernix K1中抽提出染色体基因组，经PCR扩增得到磷脂酶A2基因，用带有His—tag标记的pET15b作为表达载体，在大肠杆菌BLP中成功地诱导表达。表达产物经过Ni-螯合柱一步得到纯化。SDS—PAGE检测只有一条带，其准确分子量为17，871kD。对纯化后的磷脂酶A2测定其酶活性和生物活性，得出其最适反应温度为90％，最适pH范围为7．8-8．2。至此首次成功地在大肠杆菌中表达了古细菌嗜热磷脂酶A2，这将为以后对该酶的结构和功能以及耐热机制研究打下很好的基
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