评价NF-E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应序列原件(ARE)信号通路在氢抑制LPS致巨噬细胞炎症因子释放中的作用。

小鼠巨噬细胞株RAW264.7接种于6孔培养板(2×10⁶个/孔)，采用随机数字表法将其分为4组(n＝24)：对照组(C组)、LPS组、富氢液＋LPS组(LPS＋H₂组)和Nrf2小干扰RNA(siRNA)＋ LPS＋富氢液组(siRNA＋LPS＋H₂组)。LPS组加入LPS 1 μg/ml；LPS＋H₂组加入LPS 1 μg/ml，培养基更换为0.6 mmol/L的富氢液培养基；siRNA＋LPS＋H₂组将Nrf2-siRN成功转染至细胞后，继续培养24 h，加入LPS 1 μg/ml，培养基更换为0.6 mmol/L的富氢液培养基。于孵育24 h时，收集上清液，采用比色法测定LDH活性，采用ELISA法检测TNF-α、IL-1β、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和IL-6的浓度；收集细胞，采用MTT法测定细胞增殖水平，采用Western blot法检测Nrf2和血红素氧合酶-1(HO-1)的表达水平。

与C组比较，LPS组和siRNA＋ LPS＋H₂组上清液LDH活性、TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1的浓度升高，细胞增殖水平降低，HO-1表达上调，LPS组和LPS＋H₂组细胞Nrf2表达上调(P<0.05)；与LPS组比较，LPS＋H₂组上清液LDH活性、TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1的浓度降低，细胞增殖水平升高，Nrf2和HO-1的表达上调，siRNA＋LPS＋H₂组细胞Nrf2和HO-1的表达下调(P<0.05)；与LPS＋H₂比较，LPS＋H₂＋siRNA组上清液LDH活性、TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1的浓度升高，细胞增殖水平降低，Nrf2和HO-1的表达下调(P<0.05)。

氢抑制LPS致巨噬细胞炎症因子释放的机制与激活Nrf2/ARE信号通路有关。