【摘 要】
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目的 观察细胞自噬在表柔比星(EPI)诱导膀胱癌T24细胞凋亡中的作用.方法 用噻唑蓝(MTT)筛选出EPI处理浓度,实验分为正常对照组、EPI组、EPI联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组及单用3-MA组,药物处理膀胱癌T24细胞24 h后,MTT和流式细胞术分别检测药物对细胞增殖抑制率和细胞凋亡率的影响,免疫荧光检测微管相关蛋白轻链3蛋白(LC3 Ⅰ、Ⅱ)表达,逆转录-聚合酶链反应(RT
【机 构】
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目的 观察细胞自噬在表柔比星(EPI)诱导膀胱癌T24细胞凋亡中的作用.方法 用噻唑蓝(MTT)筛选出EPI处理浓度,实验分为正常对照组、EPI组、EPI联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组及单用3-MA组,药物处理膀胱癌T24细胞24 h后,MTT和流式细胞术分别检测药物对细胞增殖抑制率和细胞凋亡率的影响,免疫荧光检测微管相关蛋白轻链3蛋白(LC3 Ⅰ、Ⅱ)表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测Beclin-1和LC3 Ⅰ、Ⅱ的表达.结果 EPI组自噬相关基因LC3、LC3-Ⅱ及Beclin-1表达较正常对照组有明显增高；EPI联合自噬抑制剂3-MA作用后,自噬相关基因LC3、LC3-Ⅱ及Beclin-1表达较EPI组有明显下降,而细胞增殖抑制率从(36.99±0.69)％增加到(57.65±2.97)％,细胞凋亡率从(22.35±1.03)％增加到(36.94±1.63)％.结论 EPI作用于T24肿瘤细胞时介导引起的细胞自噬抑制T24肿瘤细胞凋亡,而抑制细胞自噬则起到了化疗协同作用。
其他文献
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缺氧会降低前列腺癌(Pca)放疗效果,该过程可能是通过缺氧诱导因子-1α(HIF-1 α)介导的,降低HIF-1 α表达可能有放疗增敏作用.我们沉默前列腺癌PC3细胞的HIF-1α基因,观察其放射增敏作用.一、材料与方法分空白对照组:PC3;阴性对照组:PC3+ NC siRNA;干扰组:PC3+HIF-1α小干扰RNA(siRNA).按Lipofectamin2000操作手册转染后48 h放疗,
目的 观察颈部胸导管结扎/引流对重症急性胰腺炎(SAP)并发急性肺损伤(ALI)早期干预的影响.方法 5％牛磺胆酸钠逆行胰胆管内注射制大鼠SAP并ALI模型,分为假手术组(SO)、胰腺炎组(SAP)、胸导管结扎组(LC)、胸导管引流组(DC),观察胸导管结扎/引流在SAP并发ALI时对肺脏组织病理形态、超微结构、动脉血PaO2和PaCO2的影响,以Western blot法检测生存素( Survi
目的 分选出HepG2中侧群(SP)细胞并探讨其生物学特性.方法 流式细胞仪分选出SP细胞为实验组,同代常规培养HepG2为对照组,利用非肥胖糖尿病/严重联合免疫缺陷(NOD/SCID)鼠接种实验、黏附实验、Transwell、迁移实验、成球培养实验检测两者生物学特性差异.结果 接种实验显示2×104个SP细胞即能成瘤；两组细胞黏附能力[(16.19±3.68)％比(25.01±13.97)％]和
核桃楸是我国重要的药源植物,其树皮、根皮、叶片、未成熟外果皮及果壳均可入药[1],目前对核桃楸皮药理活性的研究主要集中在抗肿瘤方面,林瑞新等[2]研究证实,核桃楸皮提取物(JMME)可通过影响胃癌细胞的周期,促进细胞凋亡,抑制其增殖.我们选用接种人肝癌细胞株SMMC-7721的小鼠作为研究对象,观察核桃楸皮提取物的抗肿瘤效果。
目的 观察腹腔镜胃癌根治术对患者机体细胞免疫功能的影响.方法 选取102例进展期胃癌患者分成腹腔镜组53例、开腹组49例,分别行腹腔镜胃癌根治术和开腹胃癌根治术,采用流式细胞仪测定患者术前1d及术后第1天及第5天外周血中CD3、CD4+、CD8+、CD19及自然杀伤(NK)细胞比例的变化,研究不同手术方式对患者细胞免疫功能的影响.结果 腹腔镜组术中出血量[(82.50±50.33) ml]显著少于
乳腺癌区域淋巴结清扫是根治术的重要组成部分.Jiang等[1]对乳腺癌根治术按常规方法找寻淋巴结后的腋窝组织行溶脂法,每例再捡出(6.9±5.3)枚淋巴结,说明手术清扫仍难以避免淋巴结残存及肿瘤残留的问题.活性碳吸附抗癌药物局部使用具有淋巴趋向性,进入淋巴结后缓慢释放抗癌药物,使区域淋巴结内较长时间维持高浓度的抗癌药物,从而靶向杀伤淋巴系统内的肿瘤细胞[2-5]。
目的 观察血管性痴呆模型大鼠白细胞介素-32(IL-32)水平的变化及其对大鼠认知功能的影响.方法 SD雄性大鼠30只,随机分为模型组和对照组,每组15只,模型组大鼠双侧颈总动脉永久性结扎(2VO),对照组大鼠仅分离双侧颈总动脉而不结扎；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测术后第3、7、14、28天大鼠血清中IL-32的水平,采用Morris水迷宫评价大鼠的认知功能；术后第28天处死大鼠,取脑组织H
目的 观察免疫分子叉状头/翅膀状螺旋转录因子Foxp3和若干细胞因子在BXSB狼疮小鼠血清及小肠组织的水平变化,探讨与狼疮性肠炎发病有关的免疫机制.方法 选取8周龄及16周龄雄性BXSB小鼠,并以8周龄C57BL/6雄性小鼠为正常对照,用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法,检测Foxp3在小鼠小肠中的mRNA表达水平；用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小肠组织和血清白细胞介素
Th2细胞因子白细胞介素(IL)-13在大鼠心脏移植及肾移植中可抑制巨噬细胞的激活而减轻排斥反应,延长移植物生存[1-2].本研究旨在观察外源性IL-13对大鼠肝移植物中kupffer细胞的影响.一、材料与方法1.实验动物及动物模型:雄性Lewis大鼠(LEW)与Brown Norway大鼠(BN),体质量230 ～ 250 g.采用重建肝动脉的大鼠肝移植模型,具体方法详见文献[3]。