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目的:构建小鼠蛋白激酶CK2 β亚基cDNA重组表达质粒,以便深入进行CK2结构与功能的研究.方法:通过反转录PCR从NIH3T3 小鼠成纤维细胞中获得小鼠蛋白激酶CK2 β亚基编码区cDNA,PCR扩增酶为高保真DNA聚合酶.将Nde I/HindⅢ彻底双酶切PCR产物定向连接到牛小肠碱性磷酸酶去5′端磷酸的同样彻底Nde I/HindⅢ双酶切的表达载体pT7-7中,转化感受态大肠杆菌DH5α获得转化子,用0.8%琼脂糖凝胶电泳初步筛选转化子,将阳性克隆进行单和双酶切分析鉴定.随机挑选两个阳性克隆进行D