一种促分裂活性降低的hbFGF突变体的表达及纯化

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liongliong564

【摘要】

：

为了降低由人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的广谱促分裂活性引起的潜在副作用,用中性氨基酸丙氨酸取代了hbFGF第108位的丝氨酸,构建了促分裂活性降低的hbFGF突变体(mhbFGF)

【作者】

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吴晓萍李校堃苏志坚郑青吴思娴许华曲红艳

【机构】

：

暨南大学药学院医药生物技术研究开发中心

【出处】

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中国生物工程杂志

【发表日期】

：

2005年2期

【关键词】

：

FGF 活性纯化表达肝素亲和层析 MTT法副作用人碱性成纤维细胞生长因子突变体 IPTG Human basic fibroblast growth

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划(863计划)

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为了降低由人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的广谱促分裂活性引起的潜在副作用,用中性氨基酸丙氨酸取代了hbFGF第108位的丝氨酸,构建了促分裂活性降低的hbFGF突变体(mhbFGF).IPTG诱导突变体在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达.mhbFGF的表达量约为全菌体蛋白的30%.通过离子交换和肝素亲和层析从菌体上清中纯化目标蛋白.MTT法检测促分裂活性表明,mhbFGF的促分裂活性显著低于野生型hbFGF.纯化的mhbFGF可用于进一步的药效和安全性研究.

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