基于斑马鱼模型探究多花黄精多糖的免疫调节作用

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目的:探讨多花黄精多糖(Polygonatum cyrtonema Hua polysaccharides,PCP)及PCP-1对氯霉素所致免疫损伤的保护作用。方法:采用水提醇沉法得到黄精粗多糖,除蛋白脱色素后,得到PCP。利用DEAE-Sepharose Fast Flow层析柱和HW-55F凝胶柱先后对PCP进行洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,冷冻干燥后得到纯化的PCP-1。以受精后2天(2 dpf)的转基因斑马鱼为实验动物,采用不同浓度的氯霉素处理,通过比较斑马鱼尾部中性粒细胞的数目,确定氯霉素的最优造模剂量,建立斑马鱼免疫抑制模型。分别加入不同浓度的PCP和PCP-1孵育24 h后,拍照统计斑马鱼泄殖腔至尾部中性粒细胞数目,观察PCP和PCP-1的免疫调节作用。结果:PCP-1为均一多糖,分子量为3 350 Da。与溶剂对照组相比,氯霉素组的中性粒细胞数目显著减少(P<0.01);与氯霉素组相比,在实验剂量范围内,PCP和PCP-1均可以增加斑马鱼体内中性粒细胞的数目(P<0.01),且量效关系明显。结论:PCP和PCP-1均具有一定的增强免疫活性及改善免疫损伤的作用。
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