稳定表达UT—A2的FRT细胞系的建立与鉴定

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:NK123456
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目的:建立稳定表达尿素通道蛋白A2(UT—A2)的FRT细胞系,为寻找UT—A2抑制剂提供细胞模型。方法:通过真核表达质粒-脂质体介导的方法,将UT—A2 cDNA与真核表达载体pUB6/V5连接后的重组质粒转染入FRT细胞,经稳定筛选建立稳定表达UT—A2的FRT细胞系。功能检测实验将细胞分为对照组和稳定转染组,用2mol/L尿素负荷试验检测稳定表达UT—A2的FRT细胞膜的尿素通透性。结果:经BSD筛选21d后得到稳定表达UT—A2的细胞株;Western blotting证实UT—A2蛋白稳定表达;
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