【摘 要】
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目的构建PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体并建立被稳定感染的HepG2单克隆细胞株。方法设计PRL-3基因特异性RNAi靶序列,合成靶序列的DNA oligo,退火形成双链DNA,与含绿色荧光蛋白（G
【机 构】
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佛山市第一人民医院胆道外科,中山大学附属第三医院肝移植科
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目的构建PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体并建立被稳定感染的HepG2单克隆细胞株。方法设计PRL-3基因特异性RNAi靶序列,合成靶序列的DNA oligo,退火形成双链DNA,与含绿色荧光蛋白（GFP）编码基因的pGCL-GFP线性化载体连接,产生重组慢病毒质粒LV-PRL3-siRNA,转化感受态细胞,PCR筛选阳性克隆,并测序鉴定。用Lipofectamine 2000将LV-PRL3-siRNA、pHelper 1.0和pHelper 2.0这3种质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒,经孔稀释
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