【摘 要】
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研究分别将K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的gp85基因以及env基因分别克隆到原核表达载体pColdⅠ以及真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证后分别命名为pCold-K-gp85以及pcDNA3.1-K-e
【机 构】
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扬州大学兽医学院禽类预防医学教育部重点实验室江苏省动物预防医学重点实验室; 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 扬州大学农业科技发展研究院; 教育部农业与
【基金项目】
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国家重点研发项目(2016YFD0501605);国家自然科学基金中英联合项目(31761133002、BB/R012865/1);大学生实践创新训练项目(X20180643);江苏高校优势学科建设工程资助项目
论文部分内容阅读
研究分别将K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的gp85基因以及env基因分别克隆到原核表达载体pColdⅠ以及真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证后分别命名为pCold-K-gp85以及pcDNA3.1-K-env。pCold-K-gp85转化BL21大肠杆菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析发现,该Gp85重组蛋白主要表达在包涵体中。利用纯化后Gp85重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了抗ALV-K Gp85蛋白的多克隆抗体。间接免疫荧光以及Western blot试验进一步证明,所获得的抗Gp85蛋白的多克隆抗体能特异性的识别转染pcDNA3.1-K-env质粒以及感染ALV-K的DF-1细胞内表达的Env蛋白。以上研究结果为进一步探究ALV-K宿主范围,细胞受体鉴定及亚群特异性诊断技术研究奠定了基础。
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