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对1株耐高糖酿酒酵母的原生质体制备和再生条件进行了研究。结果表明，发酵7h后为对数生长中期，适宜原生质体化；L16（5）确定制备原生质体的最佳条件为蜗牛酶浓度（1．0％）、KCl高渗缓冲液（0．7mol／L）、酶解时间（1．5h）、预处理剂（0．1％β-巯基乙醇）和酶解温度（26℃），在此条件下原生质体形成率和再生率分别为80．84％和36．03％；原生质体形成后在7％蔗糖高渗培养基上夹层培养再生率较高（39．78％）。