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[目的]建立高效液相色谱法测定人体血清中大黄素含量的方法，为人体血清中大黄素浓度的测定及药代动力学、生物利用度研究提供新的定量方法。[方法]采用Nova—PakC18（3．9mm×150mm，4μm）色谱柱，流动相为甲醇-0．1％磷酸溶液（80：20），紫外检测器检测，检测波长254nm。[结果]大黄素在（0．1～20）μg／mL范围内具有良好的线性关系，r=0．9993，平均回收率为99．01％，日内RSD为2．16％，日间RSD为3．78％。[结论]本方法操作简单，数据准确，重现性好，适用于