【摘 要】
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目的 构建人MCHR2真核表达载体，转染CHO细胞，建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法，以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列，利用DNA重组技术将其定向
【机 构】
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重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金(30671008)~~
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目的 构建人MCHR2真核表达载体，转染CHO细胞，建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法，以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列，利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3．1（＋），经酶切和测序鉴定后，用脂质体转染法转染CHO细胞，通过G418筛选，建立稳定转染的CHO细胞系，用RT-PCR、Western blot及免疫荧光法检测MCHR2的表达。结果 成功构建了pcDNA3．1（＋）／MCHR2真核表达载体，并建立了稳定转染的CHO细胞系，成功
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