【摘 要】
:
初步研究IL-34对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cell,SMSC)色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF
【机 构】
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大连医科大学基础医学院免疫学教研室; 大连医科大学附属第二医院;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81373214;81671606);大连医科大学转化医学专项基金资助项目(2015010);大连医科大学基础医学学科“青年教师助飞计划”项目
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初步研究IL-34对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cell,SMSC)色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)表达的影响。选取6例RA患者,分离并培养其SMSC,加入PE标记的抗CD73、CD90、CD105抗体和APC标记的抗CD14、CD34、CD45抗体及同型对照,采用流式细胞术检测SMSC表型。而后加入IL-34(100ng/mL)刺激0h、6h、24h、48h以及72h、信号通路抑制剂(10μmol/L)刺激1h/IL-34(100ng/mL)刺激24h,通过ELISA检测SMSC培养上清中PEDF蛋白的表达,RT-PCR检测SMSC PEDF的转录水平。组间比较采用独立样本t检验。对培养细胞克隆进行鉴定,结果显示细胞表面阳性表达CD73、CD90、CD105,阴性表达CD14、CD34、CD45。PCR结果显示,与对照组相比,IL-34刺激6h的PEDF mRNA水平明显降低。同时ELISA表明,IL-34刺激24h、48h以及72h后的PEDF蛋白水平与对照组相比,也明显降低(P<0.05)。在细胞培养体系中加入NF-κB、p38MAPK信号通路抑制剂后,RA SMSC产生的PEDF水平明显升高(P<0.05)。以上结果显示,实验中分离纯化的RA SMSC高表达CD73、CD90、CD105,不表达CD14、CD34、CD45,符合SMSC表型特点。IL-34介导的抑制RA SMSC分泌PEDF可能通过激活p38 MAPK和NF-κB信号通路实现。
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