IL-34对类风湿关节炎滑膜间充质干细胞色素上皮衍生因子表达的作用研究

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初步研究IL-34对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cell,SMSC)色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)表达的影响。选取6例RA患者,分离并培养其SMSC,加入PE标记的抗CD73、CD90、CD105抗体和APC标记的抗CD14、CD34、CD45抗体及同型对照,采用流式细胞术检测SMSC表型。而后加入IL-34(100ng/mL)刺激0h、6h、24h、48h以及72h、信号通路抑制剂(10μmol/L)刺激1h/IL-34(100ng/mL)刺激24h,通过ELISA检测SMSC培养上清中PEDF蛋白的表达,RT-PCR检测SMSC PEDF的转录水平。组间比较采用独立样本t检验。对培养细胞克隆进行鉴定,结果显示细胞表面阳性表达CD73、CD90、CD105,阴性表达CD14、CD34、CD45。PCR结果显示,与对照组相比,IL-34刺激6h的PEDF mRNA水平明显降低。同时ELISA表明,IL-34刺激24h、48h以及72h后的PEDF蛋白水平与对照组相比,也明显降低(P<0.05)。在细胞培养体系中加入NF-κB、p38MAPK信号通路抑制剂后,RA SMSC产生的PEDF水平明显升高(P<0.05)。以上结果显示,实验中分离纯化的RA SMSC高表达CD73、CD90、CD105,不表达CD14、CD34、CD45,符合SMSC表型特点。IL-34介导的抑制RA SMSC分泌PEDF可能通过激活p38 MAPK和NF-κB信号通路实现。
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