【摘 要】
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目的建立一种高效、准确的HBV基因分型及核苷类药物相关耐药突变位点分析的新方法。方法2011年7至8月在太原市第三人民医院收集48份乙型肝炎患者血清标本，利用商品化核酸提取试剂盒提取标本DNA，然后分别进行HBV全基因组和P基因片段扩增，最后对产物进行测序分析，通过构建系统发生树和Genotyping软件分析两种方法进行基因分型，并对两种扩增产物的分型结果进行比较。结果共得到48条HBV全基因组序
【机 构】
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030012太原市第三人民医院检验科,北京鑫诺美迪基因检测技术有限公司,030012太原市第三人民医院检验科
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目的建立一种高效、准确的HBV基因分型及核苷类药物相关耐药突变位点分析的新方法。
方法2011年7至8月在太原市第三人民医院收集48份乙型肝炎患者血清标本，利用商品化核酸提取试剂盒提取标本DNA，然后分别进行HBV全基因组和P基因片段扩增，最后对产物进行测序分析，通过构建系统发生树和Genotyping软件分析两种方法进行基因分型，并对两种扩增产物的分型结果进行比较。
结果共得到48条HBV全基因组序列，通过构建系统发生树和Genotyping软件分析两种方法确定12条B型序列和36条C型序列；对HBV P基因片段测序产生的序列进行分型，结果与全基因组测序分析完全一致。通过对HBV P基因序列进行分析，共发现7种核苷类药物耐药突变形式，所测标本突变比例达27.1%（13/48），其中所有突变均与拉米夫定或阿德福韦酯相关，未检测到其他核苷类药物相关耐药突变位点。另外，利用荧光定量PCR法对同样48份标本进行分型检测，共得出B型11例，C型35例，BC混合型2例。
结论乙型肝炎病毒P基因片段测序可能是一种新型乙型肝炎病毒分型方法。同时，该方法还可对核苷类药物相关耐药突变进行分析，为乙型肝炎临床治疗提供依据。（中华检验医学杂志，2012,35：726-729）
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