【摘 要】
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目的利用高分辨率熔解曲线（HRM）技术建立简便有效的血友病B（HB）基因诊断的方法。方法收集2005年1月至2010年6月就诊于上海瑞金医院的55例HB患者的外周血标本，抽提外周血基因组DNA。采用PCR扩增结合测序的方法对40例HB患者进行F9基因突变检测，利用其中21例带有F9基因1～7号外显子突变的HB患者标本建立相应的HRM突变筛查方法。采用F9基因1～7号外显子的PCR-HRM突变筛查方
【机 构】
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200127上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科,上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科,200127上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科,上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科
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目的利用高分辨率熔解曲线（HRM）技术建立简便有效的血友病B（HB）基因诊断的方法。
方法收集2005年1月至2010年6月就诊于上海瑞金医院的55例HB患者的外周血标本，抽提外周血基因组DNA。采用PCR扩增结合测序的方法对40例HB患者进行F9基因突变检测，利用其中21例带有F9基因1～7号外显子突变的HB患者标本建立相应的HRM突变筛查方法。采用F9基因1～7号外显子的PCR-HRM突变筛查方法及8号外显子的DNA直接测序方法，对15例未知F9基因突变的HB患者进行基因诊断。
结果通过PCR扩增结合测序，40例HB患者均检测到F9基因突变。21例带有F9基因1～7号外显子突变的HB患者标本中，19例（90％）患者的突变可通过PCR-HRM技术进行检测。通过F9基因1～7号外显子PCR-HRM突变筛查及8号外显子的DNA直接测序，15例未知F9基因突变的HB患者均检测到F9基因突变。55例HB患者中共检测到34种F9基因突变。
结论HB基因诊断的新方法，即PCR-HRM筛查F9基因1～7号外显子突变结合8号外显子的DNA测序法操作简便、结果可靠。（中华检验医学杂志，2012，35：620-624）
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