早幼粒细胞白血病蛋白在髓系白血病细胞中的表达及对细胞增殖的影响

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目的

探讨早幼粒细胞白血病(promyelocyte leukemia,PML)蛋白在髓系白血病中的表达及其对人慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞增殖的影响。

方法

采用实时荧光定量PCR技术检测了30例慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者及24名健康对照者外周血单个核细胞中PML mRNA水平的差异。构建PML的真核表达载体,转染K562细胞后筛选出稳定表达PML的细胞株,以稳定表达空载体的细胞为对照。四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞术分别检测PML过表达对细胞增殖和细胞周期的影响,并进一步用反转录-PCR(RT-PCR)和蛋白质印迹技术(Western blot)检测增殖相关因子c-myc和p27kip1(p27)mRNA水平以及蛋白表达水平的改变。最后检测了CML患者及健康对照者外周血单个核细胞中c-myc和p27 mRNA水平的差异。

结果

CML患者外周血单个核细胞中PML mRNA表达水平(ΔCt=9.02±0.74)明显低于健康对照组(ΔCt=7.91±0.34),差异有统计学意义(t=5.07,P<0.001)。PML过表达能明显抑制K562细胞增殖,引起细胞周期G0/G1期阻滞。PML稳定表达的K562细胞中,c-myc的mRNA和蛋白表达水平降低,p27的m RNA和蛋白表达水平升高。CML患者外周血单个核细胞中c-myc的mRNA表达水平(ΔCt=7.13±0.43)显著高于健康对照组(ΔCt=9.35±0.82),差异有统计学意义(t=6.78,P<0.001),而p27的mRNA表达水平(ΔCt=4.56±0.58)则显著低于健康对照组(ΔCt=3.29±0.92),差异有统计学意义(t=2.93,P<0.01)。

结论

PML在CML患者中低表达,PML可能通过调节cmyc和p27的表达从而抑制白血病细胞的增殖。(中华检验医学杂志,2013,36:395-399)

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