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目的将脑源性神经生长因子（BDNF）构建到表达质粒（pEGFP-N1）上。方法本实验采用RT-PCR的方法,从大鼠海马总RNA中扩增目的基因,分别用一步法（直接构建到表达载体上）和两步法（先构建到克隆载体再构建到表达载体上）构建重组载体,通过酶切和基因测序筛选鉴定正确的阳性克隆,并对两种方法做简单的比较。结果两种方法构建的重组载体都插入了正确的序列。两步法的转染效率明显高于一步法,但一步法也同样得到了正确的阳性克隆。结论成功构建了pEGFP-BDNF重组表达载体。