不同来源胆盐水解酶基因在大肠杆菌中的表达

来源 :食品科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wanghao521146

【摘要】

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根据GenBank上报道的两歧双歧杆菌ATCC 29521的胆盐水解酶基因(BSH)序列和嗜酸乳杆菌NCFM的胆盐水解酶基因(BSHA和BSHB)序列,设计引物通过PCR扩增获得BSH基因,将其连接到表达

【作者】

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杨士芹满朝新曲行光李彬谢鲲吴姜毓君

【机构】

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东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨,150030国家乳品工程技术研究中心,黑龙江哈尔滨,150086;东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨 150030;国家乳品工程技术

【出处】

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食品科学

【发表日期】

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2013年7期

【关键词】

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胆盐水解酶克隆表达活性测定

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根据GenBank上报道的两歧双歧杆菌ATCC 29521的胆盐水解酶基因(BSH)序列和嗜酸乳杆菌NCFM的胆盐水解酶基因(BSHA和BSHB)序列,设计引物通过PCR扩增获得BSH基因,将其连接到表达载体pET28a(+),构建pET-BSH表达质粒,经IPTG诱导表达后,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明在分子质量大小约40、43、45kD处有预期条带出现,初步表明蛋白表达成功.重组菌产生的胆盐水解酶水解甘氦胆酸钠产生的甘氨酸经茚三酮比色法分析,表明该重组的胆盐水解酶具有水解活性.

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