检测纽布病毒的Real-time RT-PCR方法的建立与应用

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纽布病毒(nebovirus,NeV)是国内新发的犊牛腹泻病原,本试验目的是建立检测NeV的real-timeRT-PCR方法。根据国内NeV流行株的聚合酶基因(RdRp)序列设计引物,通过反应条件和体系优化,成功建立基于TBGreen检测NeV的real-timeRT-PCR方法。结果显示:该方法在2.9×10^1~2.9×10^9copies·μL^-1之间呈现良好的线性关系,线性相关系数R2=0.9994,扩增效率为98%;该方法只特异性检出NeV,不检出常见无关病原;
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