饱和氢气生理盐水通过调控B细胞淋巴瘤/白血病-2/B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白/半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3通路减轻幼鼠高氧环境所致的肺损伤

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目的

探讨饱和氢气生理盐水对幼鼠高氧所致肺损伤的影响及其分子机制。

方法

幼年、雄性SD大鼠63只,2周龄,体重30~50 g,将其随机数字表法分为3组:高氧组(HO组,n=21),连续7 d吸入高浓度氧气并腹腔注射生理盐水0.5 ml;高氧并饱和氢气生理盐水干预组(HO+HRS组,n=21),连续7 d吸入高浓度氧气并腹腔注射饱和氢气生理盐水0.5 ml;空白对照组(C组,n=21),连续7 d吸入空气并腹腔注射生理盐水0.5 ml。7 d观察结束后处死幼鼠,收集眼球血和肺组织,检测幼鼠血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的浓度,测定幼鼠肺脏组织湿/干重(W/D)比值、丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白的相对表达量以及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白的表达,原位缺口末端标记法(TUNEL)观察肺脏组织细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)。各指标组间比采用单因素方差分析。

结果

HO、HO+HRS组W/D比值(5.68±0.18、5.43±0.21)、血浆TNF-α[(801±183)、(611±173) pg/ml]、血浆IL-6[(519±101)、(399±95) pg/ml]、肺组织MDA含量[(8.11±2.35)、(7.01±1.56) nmol/mg蛋白]、bax蛋白的相对表达量(0.59±0.08、0.39±0.04)、Caspase-3蛋白的免疫组织化学评分[(6.01±1.01)、(3.55±1.43)分]、AI[(55.6±4.7)%、(32.5±5.4)%]高于C组,差异有统计学意义(F=7.658、9.894、10.236、5.673、120.121、5.034、85.310,P<0.05);HO组、HO+HRS组肺组织SOD含量[(9.96±2.36)、(11.21±2.26) U/mg蛋白]、bcl-2蛋白的相对表达量(0.16±0.34、0.27±0.09)、bcl-2/bax值(0.27±0.06、0.72±0.05)低于C组,差异有统计学意义(F=7.088、150.901、72.522,P<0.05);HO+HRS组W/D比值、血浆TNF-α、血浆IL-6、肺组织MDA含量、bax蛋白的相对表达量、Caspase-3蛋白的免疫组织化学评分、AI低于HO组,差异有统计学意义(F=7.658、9.894、10.236、5.673、120.121、5.034、85.310,P<0.05),肺组织SOD含量、bcl-2蛋白的相对表达量、bcl-2/bax值高于HO组,差异有统计学意义(F=7.088、150.901、72.522,P<0.05)。

结论

幼鼠在高氧环境下导致肺损伤,饱和氢气生理盐水通过调控bcl-2/bax/Caspase-3通路降低幼鼠高氧肺损伤。

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