离体成纤维细胞热损伤模型制作的研究

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目的建立离体细胞烫伤诱导凋亡的模型,深入研究组织烫伤后主要修复细胞成纤维细胞的变化. 方法利用体外细胞培养技术对含小牛血清(体积分数为5% 和10%)的DMEM培养液中的成纤维细胞进行不同温度(43,45,48℃)和不同时间(10,30,40 min)的处理,对照组细胞置于37℃水浴30 min.采用DNA凝胶电泳、Hoeschst 33258荧光染色、透射电镜等技术对烫伤细胞进行检测并分析结果. 结果在43℃和45℃水浴中,成纤维细胞孵育10,30,40 min均可出现细胞凋亡,以含体积分数为5%小牛血清的DMEM培养液、45℃水浴10 min一组最为明显.48℃中水浴30 min以上,则出现大量的细胞坏死.对照组中无明显的细胞凋亡发生. 结论热损伤能造成离体成纤维细胞发生凋亡.该方法有助于在离体情况下探讨创伤修复过程中成纤维细胞生物学特性.

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