桂枝甘草龙骨牡蛎汤类方对斑马鱼睡眠行为的影响

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目的研究桂枝甘草龙骨牡蛎汤类方对斑马鱼睡眠行为的影响。方法 96孔板分为8组,每组12孔,依次分为:空白对照组、褪黑素组、四逆加桂甘龙牡组、柴胡加龙骨牡蛎组、桂枝加龙骨牡蛎组、桂甘龙牡组6个组。将受精后第5天的野生型幼鱼用加样枪逐个加入96孔板中,每孔连幼鱼的体积为300μL,然后根据药物分组每孔用移液枪加入配置好浓度的药物60μL,空白对照组加入等量的含甲基蓝的Holt Buffer培养液,放置在幼鱼观察行为仪装置中观察。用视频跟踪系统记录不同给药组斑马鱼的休息及运动活力指标,同时给予光周期刺激,观察斑马鱼的运动活性。结果与空白对照组比较,褪黑色素组增加了睡眠总时间,减少了总的活动量和觉醒的活动量(P<0.05)。四逆加桂甘龙牡组增加了黑夜睡眠总时间,减少了总的活动量,增加了觉醒的活动量(P<0.05)。柴胡加龙骨牡蛎组、桂枝加龙骨牡蛎组和桂甘龙牡组均增加了睡眠总时间(P<0.05),降低了总的活动量和觉醒的活动量(P<0.05)。相关性分析显示四逆加桂甘龙牡组与桂甘龙牡组、柴胡加龙骨牡蛎组、桂枝加龙骨牡蛎组不具有相同作用神经通路。而桂甘龙牡组、柴胡加龙骨牡蛎组、桂枝加龙骨牡蛎组可能具有相似的神经通路。结论桂枝甘草龙骨牡蛎汤类方对斑马鱼的运动行为有抑制作用,不同配伍对斑马鱼行为节律影响不同,其作用通路亦不尽相同。
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