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目的
建立检测巨细胞病毒(CMV)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的新方法,探讨其在肾移植受者外周血的比例及其意义。
方法筛选2009年1月至2010年12月期间在解放军第三〇九医院全军器官移植研究所接受初次肾移植受者共计30例入组,健康体检志愿者10名作为健康对照组。采用四聚体技术(tetramer technology),在流式细胞仪上直接检测各组的CMV抗原特异性CTL的表达比例。
结果移植组和健康对照组外周血CMV抗原特异性CTL(CMV-pp65特异性CD8+T细胞)的阳性率在0.16%~7.21%。移植患者根据是否发生CMV活动性感染,分为巨细胞病毒阳性组(CMV+组,n=15)和巨细胞病毒阴性组(CMV–组,n=15)。CMV+组患者的CMV抗原特异性CTL的比例(2.95%±0.62%)显著高于CMV–组患者(1.17%±0.45%)和健康对照组(0.65%±0.17%),差异具有统计学意义(P=0.003、0.006)。CMV+组患者在CMV抗原(CMV-pp65)阳性期,其CMV抗原特异性CTL的比例为(2.95%±0.62%),转阴后,比例明显下降至(1.50%±0.32%)。CMV+组患者的CMV抗原特异性CTL比例与CMV-pp65阳性细胞数呈显著正相关(Pearson检验,r=0.871,P<0.01)。
结论肾移植受者外周血CMV特异性CTL比例对于判断CMV预后具有重要评价指导意义,为今后肾移植术后CMV感染靶向治疗提供依据。