【摘 要】
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【目的】制备H9亚型禽流感病毒（AIV）血凝素（HA）单克隆抗体,为检测诊断AIV提供技术支持。【方法】以灭活H9亚型AIV广西分离株为免疫原,免疫68周BALB/c雌性小鼠,然后取其脾细胞与Sp
【基金项目】
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广西自然科学基金项目(2013GXNSFDA019015);广西科学研究与技术开发计划项目(桂科重14121003-3-3,桂科合14123001-8);广西水产畜牧兽医局科技项目(桂渔牧科1204930)
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【目的】制备H9亚型禽流感病毒（AIV）血凝素（HA）单克隆抗体,为检测诊断AIV提供技术支持。【方法】以灭活H9亚型AIV广西分离株为免疫原,免疫68周BALB/c雌性小鼠,然后取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,经血凝抑制试验（HI）及间接免疫荧光试验（IFA）筛选H9亚型AIV血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞。【结果】经过4次亚克隆,获得3株稳定的H9单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为8A4、1B11和7F1细胞株,其细胞株培养上清液HI效价为27210,腹水HI效价为216219;单克隆抗体亚类鉴定结果表明,3株H9单克隆抗体均属于Ig G1亚类,其轻链均为K链。3株H9单克隆抗体只与H9亚型AIV发生特异性HI反应,而与其他HA亚型AIV及新城疫病毒（NDV）、减蛋综合症病毒（EDS）、传染性支气管炎病毒（IBV）无交叉反应。3株H9单克隆抗体细胞株的抗体分泌能力稳定性良好。【结论】用灭活H9亚型AIV为免疫原能成功制备针对H9亚型AIV血凝素的单克隆抗体,且具有良好的亚型广谱性和特异性。
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