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[目的]利用特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量PCR技术,建立大肠杆菌O157:H7污染的快速敏感特异的检测方法。[方法]以大肠杆菌O157:H7的rfbE基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以大肠杆菌O157:H7菌株提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和Mg^2+浓度,以大肠杆菌O157:H7和10种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性。[结果]建立的反应体系在引物和探针的浓度为0.6μmoL/L、0.8μmoL/L,Mg^2+浓度为4mmoL/L时,具有良好的特异性和敏感性