【摘 要】
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目的:研究脑缺血后细胞外信号调节激酶(ERK)对细胞周期调控的影响。方法:建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型,随机分为脑缺血组(对照组及干预组)和假手术组。干预组于缺血
【机 构】
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湖北医药学院附属襄阳医院神经内科; 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科;
【基金项目】
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国家自然科学基金重点资助项目(编号:30230140)
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目的:研究脑缺血后细胞外信号调节激酶(ERK)对细胞周期调控的影响。方法:建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型,随机分为脑缺血组(对照组及干预组)和假手术组。干预组于缺血前30min尾静脉注入ERK阻滞剂U0126,对照组尾静脉注入相同体积不含U0126的DMSO稀释溶液。应用免疫组织荧光化学法观察细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞周期蛋白E(Cyclin E)阳性细胞表达;免疫印迹(Western blot)检测磷酸化ERK1/2(pERK1/2)、Cyclin D1和Cyclin E的蛋白表达;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察转录因子E2FmRNA的表达。结果:干预组Cyclin D1和Cyclin E阳性表达的细胞数较对照组显著减少(P<0.05);缺血对照组pERK1/2蛋白表达明显强于干预组(P<0.05),4h时间点表达最为明显,12h时间点恢复到基线水平,Cyc-lin D1和Cyclin E表达6h开始升高,12h表达最为明显,干预组较对照组显著减弱(P<0.05);缺血对照组E2FmRNA的表达显著强于干预组和假手术组(P<0.05),以7d表达最为明显。结论:ERK在大鼠脑缺血中发挥重要作用,抑制脑缺血引起的pERK1/2磷酸化可降低细胞周期蛋白Cyclin D1、Cyclin E和E2F的表达,即细胞外信号调节激酶可影响细胞周期的调控。
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