【摘 要】
：
家蚕是鳞翅目重要的模式生物,但是目前家蚕培养细胞系少,给家蚕基础研究带来不便,也影响了家蚕作为模式生物的应用。组织体外培养在一定程度上可以代表体内环境,且操作相对简
【机 构】
：
江苏科技大学生物技术学院,中国农业科学院蚕业研究所
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目（编号 31672490,31172266）,江苏省自然科学基金项目（编号 BK20151322）,江苏省高校自然科学研究重大项目（编号 15KJA180001）.
论文部分内容阅读
家蚕是鳞翅目重要的模式生物,但是目前家蚕培养细胞系少,给家蚕基础研究带来不便,也影响了家蚕作为模式生物的应用。组织体外培养在一定程度上可以代表体内环境,且操作相对简单。我们尝试并建立了一种采用TC-100培养基体外培养丝腺组织的方法,取健康家蚕5龄2 d的幼虫,用75%乙醇进行表面消毒,灭菌水冲洗,剪开腹部表皮固定,用镊子轻轻拉出丝腺组织,用75%乙醇快速漂洗、PBS缓冲液冲洗2～3次,放入含有800μL TC-100培养基的12孔细胞培养板的培养孔中,每孔4条丝腺组织,27℃培养;将0.64μg增强荧光蛋白基因表达载体pcDNA3.0[ie1-egfp-SV40]加入到25μL不完全TC-100培养基中孵育15 min后转染丝腺组织,48 h后用荧光显微镜观察,培养基清澈,丝腺组织外形完好、发出亮绿色荧光,表明egfp在丝腺中得到了表达。为进一步验证体外培养丝腺的转染效果,将家蚕miR-0031*的抑制物(inhibitor)和阴性对照(inhibitor negetive control)各10μL按照同样方法配成转染液,加入到放有丝腺组织的培养孔中,48 h收集丝腺组织,提取总RNA,荧光定量PCR检测靶基因BmFib-L的表达量,结果显示,inhibitor抑制miR-0031*的表达,促使BmFib-L的表达量上升,表明用体外培养丝腺进行转染等试验是可行的。该方法的建立为研究蚕丝蛋白基因表达调控的分子机制提供新的技术途径,也为家蚕其他组织的体外培养和研究提供借鉴。
其他文献
应编者的要求，笔者在此为《“教育装备依赖”现象分析》一文（以下简称“依文”）做一些解释。其目的是希望对诸位国内著名专家的评论意见有一个反馈，并进一步阐明笔者作文的初衷，使得关于“教育装备依赖”现象的讨论（或争论）有个小结。平心而论，“依文”一开始没有打算是写给专家看，只是想让我们教育装备管理者的工作更加科学和理性；但既然引起了专家们的关注，就必须对问题有个澄清。 （1）“依文”的撰写目的。当一个
为有效降低柞蚕雄蛾提取液中的脂肪含量,对柞蚕雄蛾浓缩液提取工艺进行了改进,通过三步脱脂工艺在提取过程中对柞蚕雄蛾浓缩液的脂肪进行分步去除。结果表明：以新鲜柞蚕雄蛾为
贫困问题是各国各界都一直努力解决的世界难题之一,也是中国全面建成小康社会的绊脚石。我国政府近年来的扶贫工作取得了显著的成就,可以说减贫的成果与政府的投入密不可分,其中社会保障支出与贫困群体天然的联系在一起,社会保险、社会救助以及其他保障性的支出共同编织了社会多层安全网,其在扶贫工作中也发挥了重要的作用。然而,随着完成2020年全面建成小康社会的任务时间的缩短,脱贫工作仍然面临巨大的挑战。精准扶贫以
目的研究湖南省献血者与输血有关主要感染性疾病的情况. 方法 ALT采用赖氏法,HBsAg、抗-HCV、抗-HIV1/2检测采用联免疫吸附试验(ELISA),梅毒血清学检查采用快速血浆反应素环
摘 要：针对机电一体化系统设计课程涉及知识面广、综合性强的特点，采用讨论与互动式教学、实践教学、项目教学等多种方法进行教学改革和实践。多种教学方法的综合运用有利于学生学习主动性的发挥，综合设计能力的提高以及系统工程意识的培养。 关键词：机电一体化 互动教学 实践教学 项目教学 科学技术的高速发展和不断进步使机械制造业发生了巨大的变化。以信息技术为代表的高新科技向机械行业的渗透，使得现代机电产品