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为了提高质粒pHsh-celD在大肠杆菌中的表达量,运用 mRNA 二级结构预测软件对pHsh-celD翻译起始区的二级结构进行优化,得到了具有最佳 mRNA二级结构及自由能的质粒pHsh-celD I。为了进一步提高纤维素酶的表达量,在不改变目的基因翻译的氨基酸序列的前提下,celD的N-端氨基酸尽可能地使用大肠杆菌同义密码子,定点突变后得到质粒pHsh-celD II。优化后质粒pHsh-celD II表达的纤维素酶活[(6.4±0.4) U/ml]是未优化[(4.1±0.3) U