【摘 要】
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目的 探索脐血来源的间充质干细胞体外分离培养的更优方法.方法 无菌条件下抽取正常足月剖宫产胎儿的脐带血,肝素抗凝,用淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞.50份脐血分为对照
【机 构】
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江苏省徐州市医学科学研究所,江苏 徐州,221006徐州医学院;中国人民解放军第九七医院;
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目的 探索脐血来源的间充质干细胞体外分离培养的更优方法.方法 无菌条件下抽取正常足月剖宫产胎儿的脐带血,肝素抗凝,用淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞.50份脐血分为对照组和改良组,每组25份,分别以1.5×107/ml的细胞密度接种于25 cm2培养瓶中.对照组贴壁3d后弃上清,去除未贴壁细胞,更换新鲜培养液；改良组贴壁0.5h后弃上清,去除未贴壁细胞,更换新鲜培养液.结果 对照组杂细胞较多,最终成功培养出8份脐血间充质干细胞；改良组杂细胞较少,最终成功培养出18份脐血间充质干细胞.经流式细胞仪检测脐血间充质干细胞的免疫表型,结果显示,所培养出的脐血间充质干细胞不表达或极弱表达CD34、CD106等造血细胞标志,稳定地高表达CD29、CD44、CD105等间充质细胞相关的表面抗原标记物.结论 采取脐血单个核细胞贴壁0.5h弃上清更换新鲜培养液可以明显提高脐血间充质干细胞的培养成功率,其结果优于脐血单个核细胞贴壁3d弃上清更换新鲜培养液.
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