尼罗罗非鱼IgM单抗的制备及IgM + B淋巴细胞吞噬能力的研究

来源 :华南师范大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nfast

【摘要】

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采用免疫亲和层析方法纯化尼罗罗非鱼抗TNP特异性IgM,并以此为抗原免疫Babl/c小鼠进行单克隆抗体制备.免疫的小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合成杂交瘤细胞,利用酶联免疫

【作者】

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吴丽婷孔令贺王君如杨延舰尹晓雪叶剑敏

【机构】

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华南师范大学生命科学学院∥广东省水产健康安全养殖重点实验室

【出处】

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华南师范大学学报:自然科学版

【发表日期】

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2018年5期

【关键词】

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尼罗罗非鱼 IGM 单克隆抗体 IgM+B细胞吞噬能力 Nile tilapia IgM monoclonal antibody IgM + B cells

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(31172432,31472302),华南师范大学研究生创新计划项目(2017LKXM010).

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采用免疫亲和层析方法纯化尼罗罗非鱼抗TNP特异性IgM,并以此为抗原免疫Babl/c小鼠进行单克隆抗体制备.免疫的小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合成杂交瘤细胞,利用酶联免疫吸附法、蛋白质印迹法(WesternBlot)和流式细胞术筛选获得2株抗IgM重链的单克隆抗体,分别命名为3B3和9D12.纯化后的单克隆抗体3B3和9D12在1g/L质量浓度下的抗体效价分别为740741和359712unit/mL.利用制备的单抗结合激光共聚焦显微镜检测发现,膜结合型IgM位于B细胞膜表面(IgM+B细胞)

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