【摘 要】
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目的 探讨微小RNA (miRNA)-410-3p对垂体瘤细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能作用机制。方法 将对数期人垂体瘤AtT-20细胞随机分为对照组(常规培养)、miR-410-3p mimcs组(转染miR-410-3p mimcs)、mimics-NC组(转染miR-410-3p mimcs-NC)、miR-410-3p inhibitor组(转染miR-410-3p inhibitor
【基金项目】
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教育部人文社科规划基金项目(19YJAZH067); 湖南省教育厅重点项目(17A160);
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目的 探讨微小RNA (miRNA)-410-3p对垂体瘤细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能作用机制。方法 将对数期人垂体瘤AtT-20细胞随机分为对照组(常规培养)、miR-410-3p mimcs组(转染miR-410-3p mimcs)、mimics-NC组(转染miR-410-3p mimcs-NC)、miR-410-3p inhibitor组(转染miR-410-3p inhibitor)和inhibitor-NC组(转染miR-410-3p inhibitor-NC),MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,RT-qPCR检测细胞中miR-410-3p和第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白(PTEN) mRNA表达水平,双荧光素酶报告基因验证miR-410-3p与PTEN的靶向关系,Western blot法检测细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、PTEN、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、p-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR蛋白表达水平。结果 与对照组和mimcs-NC组比较,miR-410-3p mimcs组细胞24、48 h OD490nm值增加,miR-410-3p、Bcl-2、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平升高,凋亡率、PTEN mRNA和蛋白、Bax蛋白表达水平降低(P<0.05);与对照组和inhibitor-NC组比较,miR-410-3p inhibitor组细胞24、48h OD490nm值减小,miR-410-3p、Bcl-2、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平降低,凋亡率、PTEN mRNA和蛋白、Bax蛋白表达水平升高(P<0.05);与miR-410-3p mimcs组比较,miR-410-3p inhibitor组细胞24、48h OD490nm值减小,miR-410-3p、Bcl-2、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平降低,凋亡率、PTEN mRNA和蛋白、Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论miR-410-3p可促进人垂体瘤AtT-20细胞增殖,抑制细胞凋亡,可能与靶向抑制PTEN表达,进而激活下游Akt/mTOR信号通路有关。
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