【摘 要】
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用Oligo(dT)软件设计了1对酸性核糖体磷蛋白P2(arpP2)基因特异引物,以pUC18-P2为模板,经PCR扩增出366 bp的猪囊虫arpP2片段,酶切回收后与经过相同处理的pFASTBAC供体质粒连接
【机 构】
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中国农业科学院,山东省农业科学院生命科学研究中心
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)
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用Oligo(dT)软件设计了1对酸性核糖体磷蛋白P2(arpP2)基因特异引物,以pUC18-P2为模板,经PCR扩增出366 bp的猪囊虫arpP2片段,酶切回收后与经过相同处理的pFASTBAC供体质粒连接,转化DH5α感受态细胞;对重组质粒经酶切和PCR鉴定后再转化DH10BAC感受态细胞,提取高分子Bacmid DNA,用Lipofectin法转染Sf9单层昆虫细胞,待出现细胞病变后收集培养上清液,重新感染昆虫细胞,提取细胞DNA进行PCR鉴定,证明含有arpP2基因的重组杆状病毒成功地感染了昆
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