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建立了一种全自动在线涡流固相萃取-液相色谱-质谱联用直接分析血清中4种雄激素的分析方法。50μL血清样品经高速离心后,可直接用涡流固相萃取柱在线富集和分析。 Turboflow C18-P在线固相萃取柱可有效去除血清基质。最佳上样流速和洗脱时间分别为4.0 mL/min和1.0 min。方法的线性范围在1.0～100.0μg/L之间,4种雄激素的检出限在0.2～0.3μg/L之间,相对标准偏差为2.9％～14.1％（n=5）。应用本方法对实际血清样品进行了分析,整个分析过程包括提取、分离、检测以及柱子再生